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La cytométrie en flux tient une place essentielle dans le diagnostic des hémopathies malignes. Les données immunophénotypiques font en effet partie intégrante de la classification des hémopathies lymphoïdes matures, des leucémies aiguës et de bien d’autres pathologies, établie par l’Organisation mondiale de la Santé (OMS). Son importance tient aux progrès technologiques substantiels qui ont été réalisés ainsi qu’à l’acquisition des connaissances de la biologie de ces pathologies qui se sont enrichies au fil du temps, affinant toujours davantage la sémiologie immunophénotypique des maladies. Cet article propose une revue générale de cet outil diagnostique, de ses origines à aujourd’hui, et illustre ses applications majeures en hématologie. Cette technologie, réputée spécialisée et ancienne, s’inscrit comme un outil résolument moderne et les progrès qu’elle a connus ont conduit, non seulement à accroître ses performances analytiques, mais aussi à faciliter sa réalisation pratique. Aujourd’hui, la popularisation de la cytométrie en flux permet d’entrevoir son utilisation au-delà des laboratoires spécialisés pour une utilisation plus large, un diagnostic plus rapide et précis, dans le cadre de la médecine personnalisée.