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Résumé La révolution très récente de la microscopie optique, associée à l’optimisation de la résolution spatiale et de la vitesse d’observation, a ouvert l’accès à la visualisation d’objets nanométriques. Ainsi, l’utilisation d’une nouvelle génération de microscopes de super-résolution combinée à l’amélioration des marqueurs fluorescents pour les protéines ou les lipides, permet désormais d’étudier le cycle réplicatif des virus à l’échelle de la molécule unique dans des modèles cellulaires fixés, mais aussi vivants, avec une précision nanométrique. Après une brève description chronologique et technique de ces nouvelles approches, nous détaillerons dans cette revue quelques exemples de microscopies de super-résolution ayant permis de revisiter notre compréhension du cycle de réplication de certains virus affectant l’humain, dans l’étude des relations hôte-pathogènes à l’échelle du virus et de la molécule unique.

The recent revolution in optical fluorescence microscopy, supported by the optimization of both spatial resolution and acquisition speed, led to the ability to visualize nano-scaled objects. Currently, the use of a new generation of super-resolution fluorescence microscopes coupled to improved fluorescent probes gives the possibility to study the replicative cycle of viruses in living cells, at the single-virus and molecule level. In this review, after a brief chronological description of these new approaches, we highlight several examples of super-resolution microscopies that have allowed to revisit our understanding of several human viruses and of host-pathogen interactions.